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葡聚糖凝膠填料Sephadex LH-20
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葡聚糖凝膠17009002
SephadexLH-20填料用于預備純化天然產物,如類固醇、萜類、脂質和低分子量肽。
全稱為:羥丙基葡聚糖凝膠。常用商品凝膠的一種(另一種為交聯葡聚糖凝膠SephadexG)。SephadexLH-20為SephadexG-25(葡聚糖凝膠按交聯度分類的其中一種商品型號)經羥丙基化處理后得到的產物,此時,葡聚糖凝膠分子中的葡萄糖部分將與羥丙基結合成下列醚鍵形式:-OH→-OCH2CH2CH2OH
與SephadexG比較,SephadexLH-20分子中-OH基總數雖無改變,但碳原子數所占比例卻相對增加了,所以SephadexLH-20不僅可在水中應用,也可在極性有機溶劑或他們與水組成的混合溶劑中膨潤使用。
SephadexLH20是一種價錢較高的填料,特點:1、適合用有機溶劑分離嗜脂性分子,可以非常經濟地大規模制備各種天然產物2、結合凝膠過濾、分配色譜及吸附性層析于一身,分離結構非常相近的分子3、載量可高達300mg樣品/ml凝膠,極少需要再生,分離效果可保持十幾年不變。
原理:
SephadexLH-20的分離原理是根據分子大小,主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因為凝膠過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強,最后出柱。如果使用反相溶劑洗脫,SephadexLH20對化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強,后出柱。如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。
洗脫溶劑:
SephadexLH-20洗脫溶劑因分為兩類:反相和正相兩種。用得最多的是反相溶劑洗脫,以氯仿/甲醇溶解,過濾后,濕法上樣。
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