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TSKgel Tresyl-5PW色譜柱14455
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TSKgel Tresyl-5PW 親和色譜柱鍵合有2,2,2-三氟乙烷磺酰基活性基團(tuán),并且需要用戶選擇含有氨基、硫醇、苯-酚或咪唑基團(tuán)的配體活化。得到的結(jié)構(gòu)實(shí)際上是一種定制的親和配體,具有優(yōu)異的pH穩(wěn)定性和最小的配體脫落。TSKgel Tresyl-5PW 容易與氨基或巰基反應(yīng)形成穩(wěn)定的共價(jià)烷基胺或硫醚。
TSKgel Tresyl-5PW 親和色譜柱的主要應(yīng)用包括根據(jù)要純化的抗原選擇合適的抗體耦合到固定相上。pH值大于7.5條件下的抗體耦合率在90%以上,并且pH值為7.5時(shí)發(fā)生最大結(jié)合。當(dāng)抗體濃度每升親和樹(shù)脂小于2-3g時(shí),抗原有效地吸附到抗體配體。為了提高結(jié)合能力,應(yīng)該為耦合反應(yīng)添加更多抗體。然而,較高濃度的抗體會(huì)導(dǎo)致空間位阻,從而降低色譜柱的結(jié)合能力。一般情況下,抗體附著到TSKgel Tresyl-5PW 親和色譜柱所需的試劑與抗體濃度成正比。少量抗體需要大約2小時(shí)完成交聯(lián)反應(yīng),而在10g/L的濃度下,完-全附著抗體則可能需要6-7小時(shí)。
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