TSKgel G3000SW 21.5*300凝膠柱006728
尺寸排阻色譜柱（水相），粒徑10um，硅膠基質，排阻限5&amp;#215;10~5。

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更新時間：2025-07-18
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產品詳情

本應用中作者采用了TSKgel G3000SW尺寸排阻色譜柱參照《英國藥典》和《歐洲藥典》的方法，建立測定人促紅素中二聚體和高分子量物質含量的方法。分析結果顯示：單體峰的保留時間約為30~35 min。分離度溶液中二聚體與單體峰之間的分離度均大于1.5。以信噪比S/N ≥ 3為檢測限，單體峰濃度檢測限為：0.002 mg/mL。該方法專屬性強，靈敏度高，可為人促紅素原液及注射劑中二聚體和高分子量物質的質量控制提供參考。

采用 TSKgel G3000SW 色譜柱測定人促紅素中二聚體及高分子量物質

促紅細胞生成素

(Erythropoietin ; Epo)

【基本信息】

促紅細胞生成素（EPO）又稱紅細胞刺激因子、促紅素，是一種人體內源性糖蛋白激素，可刺激紅細胞生成。缺氧可刺激促紅細胞生成素產生，已有重組人促紅細胞生成素用于臨床，用于治療腎功能不全合并的貧血、獲得性免疫缺陷綜合征/艾滋病本身或治療引起的貧血、惡性腫瘤伴發(fā)的貧血及風濕病貧血等多種貧血。這里采用 TSKgel G3000SW 色譜柱建立了測定人促紅素二聚體及高分子量物質含量的方法。

【分析條件】

色譜柱： TSKgel G3000SW（7.8 mm I.D. ×60 cm）

流動相：磷酸鹽緩沖液（磷酸二氫鉀 0.2 g、無水磷酸-氫二鈉 1.2 g 和氯化鈉 23.5 g，加水溶解稀釋成 1 L，調 pH 至 7.4）

流速： 0.5 mL/min

進樣體積：50 μL

柱溫： 30 ℃

檢測器： UV @214nm

【溶液配制】

供試品溶液：取供試品，按照供試品的蛋白含量，用流動相稀釋成含蛋白 0.4 mg/ml 的溶液，混勻，作為供試品溶液。

分離度溶液：取 EPO-SEC CRS 歐洲標準品 1 瓶（蛋白含量 100 μg），精密加入 250 μL 流動相，用流動相溶解并稀釋制成 0.4 mg/mL 溶液，作為分離度溶液。

對照品溶液：精密量取分離度溶液20 μL，加980 μL流動相稀釋成0.008 mg/ml溶液，混勻，作為對照品溶液。

【分析結果】

TSKgel G3000SW 21.5*300凝膠柱006728

圖 1 HPLC 圖

（A）空白溶液；（B）EPO 分離度溶液

【結果與討論】

采用TSKgel G3000SW色譜柱參照《英國藥典》和《歐洲藥典》的方法，建立測定人促紅素中二聚體和高分子量物質含量的方法，分析譜圖見圖1。結果顯示：單體峰的保留時間約為30~35 min。分離度溶液中二聚體與單體峰之間的分離度均大于1.5。以信噪比S/N ≥ 3為檢測限，單體峰濃度檢測限為：0.002 mg/mL 。該方法專屬性強，靈敏度高，可為人促紅素原液及注射劑中二聚體和高分子量物質的質量控制提供參考。