PolyLC PolyPROPYLA色譜柱是硅膠基材料，可通過疏水相互作用（HIC），HIC分離蛋白的方法是基于蛋白質的疏水特點，比如RPC。但是，HIC使用完-全含水的緩沖器,保留住了蛋白質的三級結構和生物活性。這種分離性通常優于RPC方法分離蛋白質和多肽，能夠極大的保留蛋白質的二級結構和三級結構。

產品型號：
廠商性質：經銷商
更新時間：2025-07-22
訪問量：58

立即咨詢

聯系電話：010-85376698

產品詳情

PolyPROPYLA色譜柱是硅膠基材料，可通過疏水相互作用（HIC），HIC分離蛋白的方法是基于蛋白質的疏水特點，比如RPC。但是，HIC使用完-全含水的緩沖器,保留住了蛋白質的三級結構和生物活性。這種分離性通常優于RPC方法分離蛋白質和多肽，能夠極大的保留蛋白質的二級結構和三級結構。通常情況下,樣品使用硫酸鹽或磷酸鹽等鹽濃度降低梯度洗脫，通過增加蛋白質表面疏水性將其洗脫。表面活性劑(例如丙磺酸；辛基糖苷)如果必要的話可以被添加到流動相的。PolyPROPYLA的相對疏水值為100。HIC比其他方法有更大的敏感性，尤其是涉及到非極性基團。HIC適用于:

多維蛋白純化（建議順序:離子交換-鹽梯度洗滌分離-HIC)。
多肽的純化（比如毒液、糖肽類）
表面抗體
質量控制分析蛋白質的單一殘基的極性或者突變體的修飾位點。

大于20KDa的蛋白質建議使用1000 -或1500-A的孔。其能力可以與離子交換相媲美。除非該蛋白是公-認的顯著疏水性，建議使用PolyPROPYL A。

HIC 的問題：

脫鹽：不幸的是，HIC 中使用的鹽不可凍干。它們可以使用色譜法（空間排阻、反相等）或透析從樣品中去除。
基線：HIC 中使用的顯著鹽濃度梯度導致流動相的折射率發生巨大變化。這可能會導致基線出現人為峰。例如，當在 220 nm 處監測流出物時，使用硫酸銨梯度會產生一個上升的基線，并具有較寬的*大值。根據使用的鹽和波長，可能會觀察到基線上升或下降。該問題在 254nm 和 280nm 處不太嚴重。基線的變化對可以在線可靠檢測的蛋白質量施加了一個下限。如果蛋白質或肽含有色氨-酸，則通過監測熒光而不是吸光度可以完-全消除該問題。
變性：HIC促進三級結構的保留，大部分蛋白質被回收，80-100%的生物活性保留。但是，四元結構可能會受到影響；使用的高鹽濃度會導致一些含有亞基的蛋白質分解。這種影響通常與列無關，并且必須在每個單獨的情況下進行評估。
聚合：一般來說，這不是一個大問題。傾向于在溶液中聚集的混合物有時會從 HIC 柱中以離散峰形式洗脫。聚集通常涉及疏水相互作用，但似乎色譜柱填料的疏水表面超過了單個蛋白質單體相互結合的趨勢。

規格

具有 2µm 顆粒的色譜柱（孔徑選項：-10、-15。其他可用：ASK）

PolyLC PolyPROPYLA色譜柱