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多肽脫鹽離心柱
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使用流程
樣品制備:添加TFA到胰蛋白。酶解樣品中,使樣品中含TFA的最終濃度為0.1%。
活化:加入200 μL乙腈或甲醇至離心柱中,2500?g離心1min,棄去流出液
平衡:加入200 μL 0.1%TFA至離心柱中,2500?g離心1min,棄去流出液
上樣:將200 μL含有0.1%TFA的樣品溶液上樣至離心柱,2500?g離心1min,棄去流出液
淋洗:加入200 μL含0.1%TFA水溶液至離心柱中,2500?g離心2min
洗脫:分三次加入共200 μL 70%乙腈溶液進行洗脫,2500?g離心2min,收集濾液,在室溫下氮氣 吹至近干。
復溶:加入200 μL0.1%甲酸水或者合適溶液進行復溶,用于質譜分析。
注意事項 相關產品
1.每根離心柱最多可吸附30 μg肽;
2.根據質譜的靈敏度選擇合適的上樣體積及復溶體積;
3.上樣樣品溶液不能含有高濃度甲醇或者乙腈,若含有可采用氮吹置換溶劑;
4.塑料管容易對肽產生非特異性吸附,需避免過多使用;
5.上樣過程中需保持脫鹽柱中柱床濕潤;
6.如果樣品含有高濃度的鹽(如2M尿素或者>100 mM碳酸氫銨)重復淋洗步驟一到兩次。
7.使用產品前,需豎直放置離心管用手指輕彈管身,讓填料聚集在柱管底部,再打開瓶蓋添加溶劑
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