TSKgel Chelate-5PW色譜柱008645
TSKgel Chelate-5PW色譜柱是將亞氨基二乙酸（IDA）基團共價鍵合到G5000PW聚合物基質上。

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更新時間：2025-07-15
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TSKgel Chelate-5PW色譜柱是將亞氨基二乙酸（IDA）基團共價鍵合到G5000PW聚合物基質上。在親和色譜之前將金屬離子例如Zn2+、Ni2+或Cu2+，螯合到IDA基團上，金屬離子結合在IDA基團上的三個配位點。因此，目標分子可以緊密地結合在金屬離子的三個游離結合位點。由于結合的金屬離子濃度很高（每mL凝膠為20μmol金屬離子），TSKgel Chelate-5PW色譜柱對于目標分子有很高的結合力。

肽和蛋白質中的組-氨酸殘基在中性pH條件下通常會吸附到這些螯合離子上。使用含有咪唑或甘-氨酸的緩沖液進行蛋白質解吸。成功利用這種保留機制的關鍵是選擇合適的金屬離子和洗脫緩沖液。Cu2+與蛋白質的相互作用更加強烈，Zn2+通常能提高分辨率。使用Zn2+時，色譜柱為飽和載量，而結合較強的Cu2+的載量大約為總量的一半。蛋白的洗脫通常通過梯度增加咪唑或甘-氨酸濃度，或者梯度降低pH值來進行。甘-氨酸（HEPES緩沖液中）是一種強洗脫液，也可以解吸金屬離子，因此有必要在每次分析結束后對色譜柱進行再生。咪唑（磷酸鹽緩沖液中）是一種弱洗脫液，有必要在色譜柱運行多次以后再生。

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