TSKgel Chelate-5PW色譜柱008646
TSKgel Chelate-5PW色譜柱是將亞氨基二乙酸（IDA）基團(tuán)共價(jià)鍵合到G5000PW聚合物基質(zhì)上。

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更新時(shí)間：2025-07-15
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TSKgel Chelate-5PW色譜柱是將亞氨基二乙酸（IDA）基團(tuán)共價(jià)鍵合到G5000PW聚合物基質(zhì)上。在親和色譜之前將金屬離子例如Zn2+、Ni2+或Cu2+，螯合到IDA基團(tuán)上，金屬離子結(jié)合在IDA基團(tuán)上的三個(gè)配位點(diǎn)。因此，目標(biāo)分子可以緊密地結(jié)合在金屬離子的三個(gè)游離結(jié)合位點(diǎn)。由于結(jié)合的金屬離子濃度很高（每mL凝膠為20μmol金屬離子），TSKgel Chelate-5PW色譜柱對(duì)于目標(biāo)分子有很高的結(jié)合力。

肽和蛋白質(zhì)中的組-氨酸殘基在中性pH條件下通常會(huì)吸附到這些螯合離子上。使用含有咪唑或甘-氨酸的緩沖液進(jìn)行蛋白質(zhì)解吸。成功利用這種保留機(jī)制的關(guān)鍵是選擇合適的金屬離子和洗脫緩沖液。Cu2+與蛋白質(zhì)的相互作用更加強(qiáng)烈，Zn2+通常能提高分辨率。使用Zn2+時(shí)，色譜柱為飽和載量，而結(jié)合較強(qiáng)的Cu2+的載量大約為總量的一半。蛋白的洗脫通常通過(guò)梯度增加咪唑或甘-氨酸濃度，或者梯度降低pH值來(lái)進(jìn)行。甘-氨酸（HEPES緩沖液中）是一種強(qiáng)洗脫液，也可以解吸金屬離子，因此有必要在每次分析結(jié)束后對(duì)色譜柱進(jìn)行再生。咪唑（磷酸鹽緩沖液中）是一種弱洗脫液，有必要在色譜柱運(yùn)行多次以后再生。

TSKgel Chelate-5PW色譜柱008646